Macario venne eletto vescovo di Gerusalemme  nel 314 alla vittoria di Costantino su Massenzio a Ponte Milvio.
Prese parte al Concilio Ecumenico di Nicea del 325 contro Ario. A lui si attribuiscono, il Credo niceno-costantinopolitano (  in parte), il progetto di costruzione della basilica del Santo Sepolcro e l’impulso dato ai lavori di scavo che portarono alla scoperta della Croce del Redentore.
A quell’epoca Gerusalemme era solo diocesi suffraganea di Cesarea di Palestina. Ebbe l’onore di ricevere nella Città Santa, durante il suo pellegrinaggio in Palestina, Elena, la madre dell’imperatore.